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基因编辑技术形式有:
1、同源重组
同源重组(Homologous recombination)是最早用来编辑细胞基因组的技术方法。同源重组是在DNA的两条相似(同源)链之间遗传信息的交换(重组) 。
2 、核酸酶
基因编辑的关键是在基因组内特定位点创建DSB。常用的限制酶在切割DNA方面是有效的,但它们通常在多个位点进行识别和切割 ,特异性较差。为了克服这一问题并创建特定位点的DSB 。
基因编辑技术的应用:
基因编辑和牛体外胚胎培养等繁殖技术结合,允许使用合成的高度特异性的内切核酸酶直接在受精卵母细胞中进行基因组编辑。
CRISPR
-Cas9进一步增加了基因编辑在动物基因靶向修饰的应用范围。CRISPR-Cas9允许通过细胞质直接注射从而实现对哺乳动物受精卵多个靶标的一次性同时敲除(KO) 。
单细胞基因表达分析已经解决了人类发育的转录路线图,从中发现了关键候选基因用于功能研究。使用全基因组转录组学数据指导实验 ,基于CRISPR的基因组编辑工具使得干扰或删除关键基因以阐明其功能成为可能。
以上内容参考:百度百科—基因编辑技术
动物遗传育种实验技术
实验一
预备实验
实验二
基因组
DNA
提取
实验三
核酸纯度、浓度与分子量测定
实验四
PCR
及
RT-PCR
实验五
DNA
片段的回收和纯化
实验六
DNA
片段与载体的连接及转化
实验七
质粒
DNA
提取
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